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中药指纹图谱

随着中药在国际上的使用日趋广泛,其有效性、安全性问题也引起较多的关注。如何逐步建立中药高品质的质量标准是我国中药研究者亟需解决的问题。我国现行的中药质量标准中对于药材质量优劣定量指标主要包括纯度、异物、灰分等;辨别真伪的定性指标主要包括产地、采收期等。此外,用药材中的单一或几个化合物对某一或某几种药材进行标定也是质量标准常用的方法。然而,中药是在多种成分、多种机制的协同作用才得以发挥疗效,现行的方法都不能够全面的反映中药质量[1]

随着指纹图谱的发展,其能较好地解决目前中药质量标准体系中存在的问题。指纹图谱是基于对中药物质群整体作用的认识,借助于波谱和色谱等技术获得中药化学成分的光谱或色谱图的研究手段,是实现鉴别中药真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式。通过指纹图谱可以获得中药中已知与未知成分的相对保留时间等信息,被誉为中药的“化学条码”[2]

三七是一味重要的中药,主产于中国云南省。经过前期的实验研究可知皂苷是其中的主要有效成分。马百平课题[3]组通过建立UPLC-Qtof-MS的方法对于三七中主要的皂苷成分进行鉴定。并利用建立好的液质方法对收集的10批不同产地的三七药材进行质量评价与主成分分析。基于不同类型皂苷的精确质量数、特征的裂解形式以及保留时间等特点分离与鉴定了10批药材中的51个共同峰,其母核类型见图1。同时也总结了不合格三七中15个特征性成分。

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图1 鉴定的51种皂苷的主要母核及部分皂苷结构

    此研究中先对流动相进行优化,最终选择在流动相中各加入0.1%的甲酸作为添加物,选择了负离子作为采集模式(通过自身实验验证确实加甲酸的优势:不仅有利于降低背景噪音,皂苷会与甲酸根结合从而有利于化合物的鉴定;负离子模式下则灵敏度高于正离子模式)。
然后对收集到的三七样本进行处理(图2),然后进行液质分析,得到指纹图谱(图3),通过购买到的11种标准品以及实验中精确分子量、碎片、保留时间与文献中报道的成分等信息鉴定了10批三七中共有的51种皂苷。

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图2 三七药材前处理图

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图3 10批药材经UPLC-Qtof-MS分析后得到的指纹图谱

    最后,通过对10批药材进行PCA分析发现只有9批药材聚类在一起,其中共有的51个皂苷成分可以作为判断三七是否为优质三七的依据。为了找到它们产生较大差别的特征性成分,利用液质数据的S图确认了不合格三七药材中15个皂苷成分。

此研究建立的指纹图谱方法能应用于三七中主要皂苷的鉴定,可以快速地鉴定道地三七与掺假三七。

 

参考文献

1 黄立兰, 程文胜, 陈耀娣, 侯峰. 人参指纹图谱的研究进展. 中草药. 2013,(02):241-246.

2 李强, 杜思邈,张忠亮,吕春明,周永全,赵燕, 张宁. 中药指纹图谱技术进展及未来发展方向展望. 中草药. 2013,(22):3095-3104.

3 LIU Peng, YU He-Shui, ZHANG Li-Juan, SONG Xin-Bo, KANG Li-Pin, LIUA Jing-Yuan, ZHANG Jie, CAO Man, YU Kate, KANG Ting-Guo, MA Bai-Ping.Rapid Method for Chemical Fingerprint Analysis of Panax Noto- Ginseng Powders by Ultra Performance Liquid Chromatography Coupled with Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry. ScienceDirect. 2015,13(6):0471-0480.

 

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